??????? HPLC 色譜柱是液相色譜的重要組件，因為它是負責分離基質中分析物的色譜柱。保護和保養色譜柱可確保我們不僅獲得可靠的結果，還能無故障操作。我們都知道 HPLC 色譜柱的使用壽命是有限的，但是如何確保獲得最長的使用壽命呢？
要回答這個問題，讓我們首先看看色譜柱可能被阻塞的原因。
??????? 一、引入 HPLC 色譜柱的樣品通常多種多樣且復雜
??????? 樣品含有許多可能與 HPLC 方法條件不兼容的成分。在沒有適當的樣品制備/預處理的情況下注入此類樣品可能會導致色譜柱堵塞。在反相分離過程中，殘留的蛋白質和高疏水性化合物（如脂質）也可能不會完全洗脫出來，它們往往會慢慢吸附到色譜柱上并引起問題。
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??????? 二、不兼容的樣品稀釋劑和流動相
??????? 如果樣品稀釋劑與流動相不相容，那么當將樣品引入流動相時，樣品可能會沉淀。如果稀釋劑與流動相相比極性太強或非極性，這通常會出現。
???????? 流動相緩沖液：緩沖液通常用作 HPLC 中的流動相。重要的是在使用前過濾這些緩沖鹽。有時，由于實驗室溫度的不同，一些緩沖液成分容易沉淀。使用過高濃度的緩沖液也會導致沉淀。
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??????? 三、來自磨損的泵密封件的顆粒物
??????? 泵密封件和噴油器轉子密封件通常由橡膠材料制成。由于正常磨損，這些組件往往會在溶劑管路中產生一些碎屑。如果不對泵和進樣口進行定期維護，碎屑往往會到達色譜柱篩板并堵塞色譜柱。
??????? 四、現在我們知道了可能導致阻塞的原因。我們如何保護它？
?????? 為了保護 HPLC 色譜柱（分析型和制備型）免受污染，例如進樣中的微粒、未過濾的流動相組分或進樣器磨損的泵密封/轉子密封的碎片，建議使用恒譜生液相色譜保護柱。
???????? 五、什么是保護柱？
??????? 保護柱本質上是一個微型柱，理想情況下填充與分析柱相同的填料，并連接在分析柱之前。保護柱中的篩板與分析柱中的篩板類似。這意味著任何可能阻塞分析柱的東西都會被保護柱阻塞。然后可以通過簡單地更換色譜保護柱來移除污染物，從而保護分析柱的使用壽命。
??????? 為了了解保護柱對色譜柱壽命的作用，我們采取了實驗。對于未受保護的色譜柱連續進樣基質會導致反壓穩定且不可逆地增加。如果沒有恒譜生液相色譜保護柱保護，反壓會呈指數級增長。這種背壓的增加最終會導致色譜退化，包括譜帶展寬和可能的峰分裂。因此，方法靈敏度、定量和峰識別也可能受到不利影響。
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??????? 使用恒譜生HPLC液相色譜耗材直連（聯）分析保護柱，大大延長了色譜柱的使用壽命。在這種情況下，基質的連續進樣仍會導致壓力升高，但這是由于顆粒物被捕獲在 保護柱本身中，而不是在 UHPLC/HPLC 色譜柱中。因此，只需定期更換直聯保護柱，反壓即可恢復到起始水平，有效色譜柱壽命大大延長。
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??????? 六、購買保護柱時我應該尋找哪些功能？
??????? 保護柱的填充材料（固定相）應與分析柱的填充材料相同，這樣選擇性不會發生變化。保護柱的 ID 應與分析柱的 ID 相同或小于分析柱的 ID，以盡量減少增加的譜帶展寬。始終使用 ID 最接近色譜柱 ID 的防護裝置。保護柱的長度應盡可能短以避免額外的死體積。
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發布于: 2022-04-15